不孕不育检查方法

    实验室检查：
    1.孕激素试验  判断卵巢有无雌激素分泌可行孕激素试验。
    方法：每天肌肉注射黄体酮20mg，用3天，或每天肌内注射10mg，用5天；亦可每天口服甲地孕酮5mg，用5天。
若停药后3～7天出现阴道出血，表明该妇女体内有一定的雌激素，为Ⅰ度闭经；若无出血则为阴性，可能因为体内雌激素水平极低、子宫内膜增生不良，子宫内膜被破坏或缺如(如严重子宫内膜结核病、宫腔粘连或幼稚型子宫等)。
    2.雌激素试验  孕激素试验阴性者可以行雌激素试验，以确定孕激素试验阴性原因是否为雌激素水平低下。
    方法：口服己烯雌酚1mg/d，共20天，停药后阴道出血为Ⅱ度闭经，表明体内雌激素水平低下。其病因在卵巢、垂体或下丘脑功能不良。若做GnRH垂体兴奋试验后阴道无出血，则可明确子宫性闭经。
    3.FSH、LH、PRL测定  适当时测定血中的各种激素水平，可获得卵巢的功能状态及其影响环节等方面较多的信息，检测血清中FSH、LH、PRL、E2可以鉴别卵巢或垂体性排卵障碍于闭经。如确定卵巢是否已丧失分泌雌激素的能力，或因缺乏促性腺激素而卵巢不分泌甾体激素。用放射免疫法测定促性腺激素，按血清FSH、LH、PRL、E2值来鉴别卵巢或垂体性排卵障碍与闭经
    (1)PRL：正常值为0～20μg/L，PRL＞25μg/L，而FSH/LH水平低，则属高催乳素血症(hyperprolactinemia)，PRL升高时应进一步作头颅X线摄片或CT检查，排除垂体肿瘤。
    (2)月经周期中FSH正常值为5～20U/L，LH为5～25U/L。
    ①FSH、LH值＞40U/L，可能的情况有：卵巢功能障碍，卵巢早衰，或卵巢发育不全，卵巢不敏感综合征，分泌促性腺激素的肿瘤，17-羟化酶缺乏引起的原发性闭经等。对原发性闭经患者，应作染色体核型分析及分带检查。
    ②LH＞25U/L而FSH值正常、E2偏高或正常，特别是LH/FSH＞3时，则可能为多囊卵巢综合征，这时测定雄激素可发现雄烯二酮常上升。
    ③FSH，LH均＜5U/L，示垂体功能减退，病变可能在垂体或下丘脑，而垂体与下丘脑病变的区别，需借助GnRH试验，如结果不明确，则做蝶鞍多向断层摄片或CT检查有无异常，多向断层摄片异常时进行眼底检查。
    4.GnRH垂体兴奋试验  GnRH垂体兴奋即LHRH试验，它可以区别下丘脑或垂体性闭经，提示GnRH治疗反应。
方法：3ml生理盐水加入50μg 10肽GnRH静脉推注。分别取注射前后15，30，60和120min的血清测LH。LH峰值出现在用药后15～30min，峰值出现在用药后15～30min且绝对值增加7.5μg/L以上或LH较用药前增高3倍以上为正常反应，垂体功能良好；峰值出现在用药后60～90min为延迟反应；若LH基值低，在6μg/L以下，用药后增加值低于基值2倍为低反应。
    结果分类：①用药前FSH、LH低或正常，用药后反应正常为下丘脑功能不全型；②用药前FSH、LH低，用药后无反应为垂体功能不全型；③用药前FSH、LH基值大于30U/L，用药后垂体过度反应，为卵巢功能不全型，提示卵巢性闭经；④用药前LH高，为FSH一倍，用药后LH为过度反应，用药前FSH低或正常，用药后反应正常为多囊卵巢综合征。
    5.克罗米酚试验  克罗米酚试验方法：Ⅰ度闭经者在停药后阴道出血第5天口服克罗米酚，50～100mg/d，共5天。阳性提示轻度下丘脑型闭经。
克罗米酚可用于判断发育迟缓女性的生殖轴是否正常。
    6.促性腺激素试验  克罗米酚试验阴性，孕激素试验或雌激素试验阳性。于撤药阴道出血后第5天肌注HMG 70～150U/d，在连续用药过程中监测排卵，卵泡成熟时，再肌注HCG 5000～10000U/d，有排卵为促性腺激素试验阳性。
    7.ACTH兴奋试验  ACTH 20mg，肌注，分别测用药前、后24h尿17-酮类固醇和17-羟类固醇排泄量。PCOS者反应正常，而肾上腺皮质功能异常者17-酮类固醇和17-羟类固醇均明显增高。
    8.地塞米松抑制试验  适用于闭经男性化患者。地塞米松0.5mg，每6小时1次，共2天或7天，比较用药前尿17-酮类固醇，17-羟类固醇，血睾酮，血脱氢表雄酮等变化。若垂体-肾上腺皮质轴功能正常，则用药后由于负反馈作用，抑制ACTH，尿17-酮类固醇和17-羟类固醇值降低。但Cushing综合征、肾上腺皮质肿瘤患者则不降低。
    9.促甲状腺素释放素(TRH)刺激试验  TRH为一种三肽，能刺激垂体细胞，分泌促甲状腺素与催乳素患者先排尿，卧床休息20min，将100μg TRH溶于生理盐水中快速静脉注射在5，10，15，30与60min抽血作测定，15min内催乳素(PRL)如比基值高5～10倍，此类患者有高催乳素
    其他辅助检查：
    1.子宫颈黏液改变  宫颈黏液每天的分泌量为20～60ml，黏液呈碱性，pH值在7～8.5，排卵期黏液清亮，有利于精子的穿透。
    (1)宫颈黏液结晶的分类：最典型的羊齿植物状结晶，主干粗，分支密而长。不典型的，分支少而短或树枝形象比较模糊，或黏液中只见到椭圆体。
    (2)排卵前期的变化：黏液量增多，质稀薄，拉丝性增加，可达阴道口，为10cm长。镜下呈典型羊齿植物状结晶。排卵后受孕激素影响，宫颈口逐渐关闭，黏液量减少，羊齿状结晶逐步为椭圆体代替。
    (3)性交后试验：近排卵期性交后卧床30s～1h后来院查子宫颈黏液，检查子宫颈黏液中的精子是否存活。正常值为10～15活精子/HP，精子存活率受到子宫颈黏液性质，其中有无抗精子抗体及精液本身的影响。
    2.阴道涂片  一般采取阴道上方侧壁的刮片，用95%乙醇固定，巴氏染色。观察阴道各层，包括底层、中层、表层的比例。表层有角化前及角化细胞。在轻度雌激素的影响下，角化细胞占20%以下；中度雌激素影响，角化细胞占20%～60%；高度雌激素影响，角化细胞占60%以上，已超过正常排卵期水平。一般按成熟指数(MI)报告即：底层细胞%/中层细胞%/表层细胞%，如左侧数字增大即“左移现象”，表明雌激素水平下降，如右侧数字增大即“右移现象”，则表明雌激素水平增高。为了解体内雌激素变化可连续做阴道涂片观察。
    3.黄体酮试验  对闭经患者给予黄体酮20mg，肌注1次/d，共3～5天，如子宫内膜已受到雌激素刺激的准备，撤退性出血多发生在2天后至2周内。试验阳性表明体内尚有一定量的雌激素产生，属闭经Ⅰ度，如为阴性，须再做人工周期试验。
    4.人工周期试验  先用雌激素，如每天口服乙底酚0.5～1mg或结合雌激素0.625～1.25mg，连续21天，最后7天加用黄体酮，停药2天至2周内看有无撤退性出血，如有出血表明子宫内膜无问题，对雌、孕激素有反应，而是卵巢不能产生足量雌、孕激素，属Ⅱ度闭经。如无撤退性出血，提示内膜的问题，主要是发生在子宫内膜结核或多次刮宫后，内膜形成瘢痕或宫腔粘连(Asherman综合征)。
    5.垂体兴奋试验  可采用国产GnRH-a9肽-阿拉瑞林(alarelin)25μg，静脉注射15min后LH(黄体生成激素)升高2.5倍，60min后升高3.1倍。如不正常可能表示垂体功能受到损害。
    6.血液激素测定、染色体分析及免疫学  一般采取放射免疫方法，包括垂体卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、催乳素(PRL)，前4种激素水平的周期性变化明显，LH及FSH峰在排卵前24h出现，LH峰前24h有E2峰。排卵后P值才有所增长，报告测定值时一定要标明月经周期的天数。要了解卵巢的基本状态或其储备能力，应当在月经周期第3天采血，近绝经期FSH升高表明卵巢储备能力降低。LH/FSF，T及PRL值在诊断PCOS及闭经泌乳综合征中的意义见前述。特殊指征时，如原发性闭经或生殖器发育异常，应做染色体核型检查。
女方抗精子抗体及抗心磷脂抗体检查，可应用酶联免疫吸附试验测定(ELISA)测血液中抗体，阳性对妊娠有不利影响。
    7.连续B超监测卵泡发育及排卵  阴道B超探头接近盆腔器官，不需充盈膀胱，可以较准确地观察卵泡发育，子宫内膜厚度及特点。一般于月经周期第8天开始，优势卵泡直径接近18～22mm时排卵，卵泡消失，盆腔内出现液体。优势卵泡不破裂而突然增大，可能是LUFS。如逐步缩小即是卵泡闭锁。
    8.精液化验
    (1)精子密度：用血球计数器，数10方格以100万/ml计算。
    (2)精子活动度：数20方格内的活动精子，如小于1000万/ml，应数100方格，包括活动精子及精子总数，活动度为活动精子数(20～100格内)×100/精子总数(20～100格内同上)，活动度分为4级：Ⅲ级直线快速前进；Ⅱ级直线慢速前进；Ⅰ级原地打转；0级不活动，各实验报告方式不一致，Macleod算法为0～4，0表明不活动，1表明活动不前进，2表明前进但速度慢，3为正常前进活动，4为快速前进。
    (3)精子形态：精液1滴加PBS 1%甲醛(formaldehyde)。用1%Eosin染色，用10% Nigrosin复染，观察200个精子，分为精子头异常、精子尾异常、中段异常。正常精液化验结果：计数＞2000万/ml，活动度(Ⅲ＋Ⅱ级)＞40%(2h内)，正常形态＞30%，抗精子抗体试验(-)。每一标本内至少含1000万活动精子，显微镜高倍镜下可见7～8个活动精子，且无凝集。精浆量≥2.0ml，pH值7.2～7.8，白细胞＜1×106/ml，高倍镜下＜3～4个。
    9.子宫输卵管造影  造影时间选在月经干净后2～7天，造影后24h避免剧烈活动。如局部造影剂堆积，表明盆腔内有粘连(图1，2)。全身严重病患、子宫出血、刮宫术后禁忌做此项检查。
    8 并发症
    不育症是影响男女双方身心健康的世界性问题。国际妇产科联合会1990年估计，由于男性因素造成不育占8%～22%，女性因素占25%～37%，双方因素为21%～38%。在育龄期约有8%对夫妇有某些不育问题，以此推算，全世界有5000万～8000万人有不能生育的问题。每年约有200万对新的不育症夫妇，不同程度地出现心理家庭问题。
    9 预后
    不育症虽不是致命性疾病，但造成个人痛苦、夫妇感情破裂、家庭不和，是全世界的一个主要的医学和社会问题。解决不孕、不育、推行节育是我国计划生育和人口控制政策中不可分割的两个方面，应当引起足够的重视。